| 仪器名称：高速分选型流式细胞仪 |
品牌型号：BD FACSAria SORP | |
摆放位置：第二理工楼713内间 | |
负责老师：李楠 第二理工楼709 | |
关键性能参数： 1.配备5根激光器：包括355nm、405nm、488nm、561nm、640nm，5根激光可同时激发。 2.配有的滤光片有： 355nmLaser：440/50；530/30 405nmLaser：450/50；525/50；670/30 488nmLaser：530/30；695/40 561nmLaser：585/15；610/20；670/30；710/50；80/60 640nmLaser：670/30；730/45；780/60 3.具有多色分析的功能：可同时检测15个荧光参数，此外还包括前向角和侧向角检测器。分析速度最高为100000细胞/秒。 4.高速无菌细胞分选的功能：分选速度最高为70000细胞/秒。可进行两路和四路分选，分选到流式管、15ml离心管。具备单克隆分选收集系统，即可将细胞定位分选至24孔、48孔、96孔、384孔板内。 5.喷嘴规格：70 micron, 85 micron, 100 micron, 130 micron 。 | |
开机
1.启动电脑，在登录对话框中输入密码 BDIS#1，单击OK。
2.开启仪器主电源，打开激光器电源。若仪器刚关闭，需等到系统压力完全消除后，再开启电源。
3.双击桌面上BD FACSDiva Software 软件快捷方式。在出现的登录对话框中，无需输入密码，单击 OK 进入软件。
4. 仪器自动联机，在 cytometer窗口中确认软件已经和仪器相连接即“cytometer connected”；检测此窗口底部的各个试剂桶的状态，如果需要，添加液体或倾空废液。
5. 在cytometer 菜单中，选择 fluidics startup，启动液流。按窗口提示步骤进行操作：
（1）将气路和液路从酒精桶上断开，连接到鞘液桶相应接口上，点击 done。
（2）确认装有◎圈的闭合喷嘴在流动池上，点击 done。
（3）取下闭合喷嘴，点击 done。
（4）安装合适口径的喷嘴，点击 done。
（5）等待仪器完成液流启动，点击ok。
6.液流启动完成后，在 sort 菜单中选择 sort setup，选择与喷嘴口径相匹配的选项。
7.开启液流，点击液流窗口中的 stream 按钮。
8.打开分选仓门，检查液流是否在吸引器的中间位置，并检查断点液流窗口的断点位置。
9.关闭分选仓门和仪器上盖。
关机
1.进样管中加入 2ml的FACSClean液，点击Load 加载样本管，选择进样速度11，3-5min 后点击Unload，卸下样品管。
2.进样管中加入2ml DI water，点击Load 加载样品管，选择进样速度11, 5min 后点击Unload，卸下样品管。
3.关闭液流，点击 steam窗口中的关闭按钮。
4.检查废液桶是否己满，酒精桶是否要补充酒精。
5.在cytometer 菜单中，选择 fluidics shutdown，按窗口提示步骤进行操作：
（1）取下喷嘴，点击 done。(喷嘴应超声清洗后保存)
（2）将闭合喷嘴安装到流动池上，点击 done。
（3）将气路和液路（不包括鞘液过滤器）安装到酒精桶上，点击
done。
（4）将2ml DI Water放在上样台上，点击 done。
（5）等待仪器完成液流关闭，点击ok。
6.退出 FACSDiva 软件，并关闭计算机。
7.关闭激光电源，关闭仪器主电源。
8.拉开鞘液桶压力阀，完全释放压力。
9.填写仪器使用情况记录本。
注意事项
1. 仪器的上机操作需要在管理员老师的指导下完成。
2. 上样之前，样本必须使用400目无菌过滤网过滤，然后放在标准的无菌流式上样管中，注意上样管必须盖紧密封，防止污染。
3. 样本必须提供阴性对照，以确定阈值和各个检测通道的电压值。
4. 多种荧光染色样本，需提供各种单一荧光染色的样本用以调整检测通道之间的荧光补偿。
5. 若细胞分选后需要再次培养，请准备含合适体积培养液的收集
管，为防止污染，可在收集液中加入双抗。收集管类型有5ml流式上样管和15ml离心管。请准备足够数量的收集管以备用。
6. 拷取实验数据只能使用空白的光盘或格式化了的U盘。