| 仪器名称：多功能成像仪 |
品牌型号：耶拿 ChemStudio Plus | |
摆放位置：第二理工楼723 | |
负责老师：陈红霞+15920316432 | |
功能：采集荧光、化学发光、蛋白凝胶、印迹膜等的数字图像，并可对获得的图像自动进行数据分析。 | |
操作规程：
1、开机：打开成像仪主机电源和镜头电源，建议开机15分钟后再使用，以保证CCD冷却到工作状态；
2、扫描上机，打开电脑，双击桌面上软件图标，打开软件；
3、聚焦：将western膜放置于化学发光专用托盘中央, 滤光片打致Clear 位
3.1 预览视窗开启： 打开顶置白光（EPI white），将时间设定在50ms，点击 preview
3.2调整光圈大小：调节aperture 值至F值调至最小（最左边，即F0.95）
3.3调整Focus值，让膜的清晰度最高
4、化学发光拍照：
4.1 关闭所有光源
4.2 拍摄：Acquisition—Camera—Integration type—Dynamic Integration—Total time Exposure，Number of images填写图片张数，exposure times填写总时间。仪器将会以信号积累模式进行曝光。
4.3 点击保存，图片将会以sqv格式保存，此图片为原始数据
5、图片处理
5.1 单张图片提取： Image—Mutlti Image Actions—Extracts，选中要提取的图片，点击extract，所选图片会被提取出来，且生成一张新的图片。
5.2 图片裁剪：Image—Eidt—Adjust—Crop，执行裁剪之前必须将要裁剪的图片选中Image—Edit—Define region，一般选择矩形工具进行裁剪
5.3 噪音去除：Image—Edit—Filter—Remove Noise，去除图片噪音 (看实际需求处理)
5.4 图片调节：Image—Display control—Corrects，三个选项分别调节亮度Brigthness，对比度Contrast，伽马值Gamma；invert用于图像黑白反转
5.5 图片处理确认：图像导出前进行图像调节确认Annotations—Layer actions —Flatten layers
6、图片保存
6.1 保存前确认是否已经按4.5的操作对图片进行拉处理确认
6.2 点击Save，选择要保存的格式，tif 或 jpg； tif是图片未做修改，保持原始数据，jpg是将图片进行了压缩。
7、数据分析
7.1 western 光密度值分析：Analysis—Area Density—Define region—Rectangle，会出现一个对话框，不要点击ok，直接用鼠标拖拽框目的条带，在框好的条带上点击鼠标右键确认框的区域，出现数字即确认了改条带的区域，用鼠标左键点住刚才的这个框拖拽到第二个条带上，重复以上步骤，选择好所有的条带，点击ok完成条带选择。
7.2 查看定量结果：Analysis—Area Density—Results，点击results，结果窗口会自动弹出，Data—Export to excel可将结果导出到excel表格。Total density 是扣除了背景以后的结果，以此结果进行表达量分析。
8、关机： 拍摄完毕，关闭主机和镜头电源，关闭软件，关闭电脑，扫描下机，如实登记使用情况。
注意事项：
1、先开仪器后开电脑；
2、 仪器开机后预冷15min再进行实验；
3、 数据拷贝用光盘或经管理员格式化后的U盘；
4、按实际使用情况预约仪器，若提前用完仪器一定要释放后面的预约时间。