仪器名称:超微量分光光度计 | |
品牌型号:Implen Nanophotometer® N120 Touch | |
摆放位置:第二理工楼723 | |
负责老师:刘秋英,奥园楼南506 | |
关键性能参数: 1.最多可12通道检测 2.样品量: 2–3.5μl 3. 光度范围:0.04–160 A 4.检测范围: dsDNA:2-8000ng/μl BSA:0.06-230mg/ml |
开机
打开设备电源,等待约30秒后,设备进入操作界面,当正中出现绿色对话框显示“初始化通过”,表示自检通过,方可正常使用;如显示红色对话框,请进行相应操作或联系厂家工程师,不可直接使用。
使用
选择相应的应用程序模块,点击进入
(以下内容以核酸测量为例,蛋白质测量模块操作方法相同)
1. 首页为参数设定页面
a. 选择或输入样品对应的消光系数
b. 确认样品量、单位、背景校正、染料标签等参数设定正确
c. 样品名称将自动生成,可使用编辑器导入多样品名称
2. 检测通道选择,滑动或点击对应窗格,以确定检测通道数量,如不选择,默认为12通道;如选择Single Sample,则进入单通道检测模式。
3. 样品测量
(1)以适当方式混匀样品(使用涡旋混匀器,少量样品请手动混匀)
(2)使用移液器吸取3-3.5μl空白溶液,加载在对应检测通道的点样台中心位置(红色指示灯定位区域)
(3)轻轻的盖上样品盖
(4)点击“空白”按钮,仪器进行空白测量,显示检测基线
(5)抬起样品盖,使用无尘纸同向擦拭样品台及上盖镜面2-3次
(6)使用移液器吸取3-3.5μl样品溶液,加载在点样台中心位置(红色指示灯定位区域)
(7)轻轻的盖上样品盖
(8)点击“样品”按钮,仪器进行样品测量,显示测量数据
4. 测量数据的保存
(1)点击 保存按钮
(2)右侧选择所需保存的数据(默认为本次实验数据全部保存)
(3)左侧选择保存的格式
(4)选择保存路径(默认为系统存储器根目录,可添加子文件夹)
(5)点击“保存”按钮
所保存数据可在桌面应用程序界面,点击“结果文件保存”按钮进入查看及导出
注意事项:
样品上样前:
1. 确保样品台及反射镜充分清洁,使用无尘纸正确擦拭。特别是针对于低浓度的样品测试。在测试前使用纯水校验清洁度是理想的方法。
2. 使用清洁的样品容器,对于低浓度样品,建议使用低吸附的容器,以减小由于容器吸附导致的误差。
3. 样品应充分混匀,建议试用涡旋混匀器,建议混匀时间 5-10s。对于极少量样品,无法涡旋混匀的,适当拍打样品管进行混合。也可使用拍打及震荡的方法进行混匀
4. 使用清洁的移液器吸头,低浓度样品建议使用低吸附吸头,以减小由于吸头吸附导致的误差。
5. 吸取样品时,建议用移液器的第一档润洗吸头2-3次,再吸取液体,这是由于干燥的吸头和湿润的吸头对样品的吸附有差异。特别是对于低浓度样品,建议润洗后再吸取样品。
6. 吸取样品时,移液器应深入到页面以下约3mm处,缓慢吸取,请勿深入到最底部,底部的样品更容易积累沉淀和发生凝聚等现象,这将导致吸光度的变化。
样品上样:
1. 一般上样量为2-3μl,但考虑到吸头中可能的少量残留,建议使用3μl以上的上样量。
2. 由于液体的表面张力问题,低表面张力的样品容易平铺在样品台上,而非形成液滴状,这将导致样品测量时,实际参与测量的样品不满足最小样品量的要求,从而造成样品台与盖子反射镜面之间有空气。因此低表面张力样品,建议增加上样量。 例如:在我们的Cognito-1D™(液体指纹鉴定)软件中,使用5μl的样品量,因为一些酒类的表面张力较低。而核酸溶液,即使用2μl的样品量,也完全可以满足要求。这取决于样品的具体情况,建议经过测试确定。
3. 建议的移液方式为:将移液器吸头45°角接触样品台,后将液体推出,这将更有利于样品的附着和位于中心位置。不建议悬滴。
4. 请轻轻的盖上盖子,请勿用力盖盖子。这是因为盖子接触面积大,用力过度容易对仪器有一定的损坏。